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醫(yī)用低溫工作臺上如何進(jìn)行生物大分子的分離、純化?

文章錄入: 四度制冷  閱讀量: 4181  添加時(shí)間: 2021/08/14

醫(yī)用低溫操作臺是臨床血液檢驗(yàn)和相關(guān)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)器械,在醫(yī)用低溫操作臺上進(jìn)行生物大分子的分離和純化需要做到以下過程。

醫(yī)用低溫操作臺上進(jìn)行生物大分子的分離和純化的方法

  分離純化生物大分子的常用方法和技術(shù)有沉淀、透析、超濾、離心、層析和電泳等。

1. 沉淀。有效成分作為沉淀與其他組分分離或雜質(zhì)作為沉淀?xiàng)壍簦鄶?shù)需要離心技術(shù)。沉淀的基本原理是,根據(jù)各種物質(zhì)的結(jié)構(gòu)差異(如蛋白質(zhì)分子表面疏水基團(tuán)和親水基團(tuán)之間比例的差異)來改變?nèi)芤褐械哪承┬再|(zhì)(如pH、極性、離子強(qiáng)度、金屬離子等),就能致使抽提液中有效成分的溶解度發(fā)生變化,也稱溶解度法。

2. 鹽溶和鹽析: 在蛋白質(zhì)水溶液中加人少量的中性鹽,如硫酸銨、硫酸鈉.氯化鈉等。會增加蛋白質(zhì)分子表面的電荷,增強(qiáng)蛋白質(zhì)分子與水分子之間的作用,從而使蛋白質(zhì)在水溶液中的溶解度增大,這種現(xiàn)象稱為鹽溶

3. 選擇性變性沉淀:其原理是利用蛋白質(zhì)、酶和核酸等生物大分子對某些物理或化學(xué)因素敏感性不同,有選擇地使之變性沉淀,以達(dá)到分離提純的目的。

4. 有機(jī)溶劑沉淀蛋白質(zhì):凡能與水以任意比例混合的有機(jī)溶劑.如乙醇.甲醇、丙酮等,均可用于沉淀蛋白質(zhì)。其沉淀原理是:①脫水作用;②使水的介電常數(shù)降低,蛋白質(zhì)溶解度降低。

醫(yī)用低溫操作臺進(jìn)行生物大分子的分離和純化的純度分析方式

1. 蛋白質(zhì)的純度鑒定:電泳法、層析法等。

2. 核酸的純度鑒定:紫外線分光光度法、凝膠電泳法等。

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